VILNIUS, sausio 22 — Sputnik. Pasak "EpiVacCorona" sukūrusio Novosibirsko centro "Vektor", vakcinos imunologinis efektyvumas yra šimtas procentų. Tai sintetinis preparatas, susidedantis iš mažų SARS-CoV-2 smaigalio baltymo, COVID-19 sukėlėjo, fragmentų. Dabar vakciną bando daugiau nei trys tūkstančiai savanorių. Tuo pat metu ji pateko į civilinę apyvartą. Pranešama, kad ji turi labai mažai šalutinių poveikių, todėl vakcina tinka ir vyresnio amžiaus žmonėms. Ką reikia žinoti apie ją norintiems pasiskiepyti — RIA Novosti autorės Tatjanos Pičuginos medžiagoje.
Iš ko sudaryta "EpiVacCorona"?
Iš trijų trumpų SARS-CoV-2 koronaviruso smaigalio baltymų fragmentų, kurie yra prijungti prie baltymų nešiklio. Šie fragmentai vadinami peptidais, iš čia ir vakcinos pavadinimas — peptidinė. Baltymų nešiklis apima nukleokapsidinio baltymo, kuris supa koronaviruso RNR, fragmentus. Aliuminio hidroksidas veikia kaip medžiaga, sustiprinanti imuninį atsaką — pagalbinė priemonė. Taip pat yra pagalbinių junginių ir vandens. Visi komponentai yra sintetiniai.
Kokie peptidai yra vakcinoje?
Kaip pranešta RIA Novosti Valstybinis tyrimų centras "Vektor", vakcinos peptiduose daugiausia yra B ląstelių epitopų, baltymų nešiklis yra T-pagalbinių epitopų šaltinis. Paaiškinkime, ką tai reiškia.
SARS-CoV-2 yra RNR molekulė, suvyniota į apvalkalą — nukleokapsidą. Visa tai yra lipidiniame maišelyje, iš išorės papuoštame, kaip karūna, dideliais smaigalių baltymais. Todėl ir kalbama apie koronavirusą.
Smaigalio baltymai padeda viruso dalelei prisijungti prie žmogaus ląstelės ir patekti į vidų. Daugybė tyrimų parodė, kad šie smaigaliai sukelia didžiausią imuninį atsaką organizme. Biologų terminologijoje smaigalys yra antigenas.
Šio baltymo molekulė yra labai didelė, joje yra specialių sričių — epitopų. Juos atpažįsta imuninės sistemos ląstelės ir jie suaktyvina kovos su infekcijomis mechanizmą.
"Yra B-epitopai ir T-epitopai. Pirmieji yra vadinami antigeniniais determinantais. Tai yra antigeno molekulės ruožai, kurie jungiasi su antikūnais. Bet pirmiausia šie ruožai jungiasi su B-limfocitų receptoriais ir pradeda jų transformacijos procesą į plazmos ląsteles, galinčias gaminti antikūnus", — sako profesorė Jekaterina Kolesanova, Orechovo biomedicininės chemijos tyrimų instituto peptidų inžinerijos laboratorijos vadovė.
Tačiau ne viskas taip paprasta. Antigenas įtraukiamas į B-limfocitą kartu su pūslele-endosoma ir ten suskaidomas į trumpus fragmentus. Baltymai, kurie sudaro pagrindinį antros klasės histosuderinamumo kompleksą, jungiasi prie endosomų. "Šie baltymai sugauna kai kuriuos antigeno fragmentus, paprastai 14–20 aminorūgščių likučių, panašius į organizmo-šeimininko baltymų fragmentus. Čia vyksta draugo ar priešo atpažinimas", — tęsia ekspertė.
Toliau pagrindinio histosuderinamumo komplekso baltymai kartu su antigeno fragmentais yra veikiami B-limfocitų paviršiuje. Ir čia juos jau atpažįsta specialios imuninės pagalbinės ląstelės — T-pagalbininkai. Jie jungiasi prie B-limfocitų ir juos aktyvina. "Kad vakcina sukeltų antikūnų gamybą, joje turi būti patogeno antigenų B ir T pagalbinių epitopų", — pabrėžia profesorė Kolesanova.
Kaip veikia vakcina?
Dėl skiepijimo baltymas nešiklis visus tris peptidus tiekia į žmogaus B-limfocitą. Jie ją suaktyvina, ir pradeda gamintis apsauginiai antikūnai — imunoglobulinai. Kiekvienas B epitopas yra atsakingas už unikalaus imunoglobulino sintezę. Pirmiausia susidaro M klasės (IgM) antikūnai, vėliau — IgG, tačiau jie kraujyje išlieka ilgiausiai, o tai rodo imunitetą.
"Vektor" patvirtina, kad skiepijami antikūnai yra būdingi koronaviruso smaigalio baltymui. Imunizuotų savanorių kraujo serumai pasižymi virusus neutralizuojančiu aktyvumu. Tai reiškia, kad antikūnai sugeba ne tik atpažinti koronavirusą, bet ir jį sunaikinti.
Ar "EpiVacCorona" yra koronavirusas ar koks kitas virusas?
Ten nėra virusų ir jų dalių. Tuo vakcina ir skiriasi nuo vakcinos "Sputnik V", kurioje yra adenovirusų. "EpiVacCoron" neturi RNR, DNR, nėra gyvų ingredientų, konservantų ar antibiotikų. Kompozicija išsamiai aprašyta "Rospotrebnadzor" svetainėje, taip pat internete pateikiamose vakcinos instrukcijose.
"EpiVacCorona" sudėtyje yra peptidų — baltymų fragmentų, identiškų koronavirusui. Jie buvo dirbtinai susintetinti ir prijungti prie nešiklio baltymo — chimerinio baltymo su SARS-CoV-2 koronaviruso nukleoproteinų (N-baltymų) elementais. Kaip matyti iš patento RU2738081, užregistruoto "Vektor", padeda jį sintetinti E. coli bakterija.
"N-baltymo genas yra susiliejęs su bakterijoje esančio maltozę surišančio baltymo (MBP), kuris labai gerai tirpsta vandenyje, genu. Abu jie sintetinami kaip vienas chimerinis baltymas. Su juo lengva dirbti", — aiškina Jekaterina Kolesanova. Pasirinkti peptidai cheminės reakcijos metu yra prijungiami prie chimerinio baltymo, kad susidarytų kovalentinis ryšys.
Kaip kuriama peptidinė vakcina?
Cheminė peptidų sintezė — nuoseklus grandinės pratęsimo iš atskirų aminorūgščių liekanų procesas.
"Jei peptidas yra trumpas — ne daugiau kaip nuo aštuonių iki dešimties liekanų, sintezė yra įmanoma tirpale. Jis yra ilgesnis, bet pigesnis. Kietosios fazės metodu sintetinami ilgesni peptidai — anksčiau grynai eksperimentiniai, bet dabar vis plačiau naudojami gamyboje, nes jie yra lengvai automatizuojami. Peptidas iš aštuonių aminorūgščių liekanos kietosios fazės metodu sintetinamas per dvi valandas, maksimaliai — per dieną, atsižvelgiant į mastą, aminorūgščių seką ir įrangos charakteristikas. Toliau — valymas, dažniausiai didelio efektyvumo skysčių chromatografija. Tai gana greita, nors ir nepigu", — sako Jekaterina Kolesanova.
Sintetiniai peptidai yra susieti (konjuguoti) su baltymu nešikliu. Tai reikalinga, be kita ko, norint gauti stabilias molekules. Kuo trumpesni peptidai, tuo greičiau jie suskaidomi.
"Konjugacijos metodas yra kompanijos paslaptis, pagrindinis dalykas yra nesutrikdyti epitopų struktūros ir, jei reikia, leisti jiems, patekus į organizmą arba į antigeną pristatančios ląstelės vidų, atsiskirti nuo baltymo nešiklio. Adjuvantas sukelia vietinę uždegiminę reakciją ir pritraukia antigeną pristatančias ląsteles į vakcinos injekcijos vietą" — sako tyrėja.
Kaip suleidžiama vakcina?
Vakcina suleidžiama kaip suspensija ir švirkštu sušvirkščiama į peties raumenį. Peptidiniai preparatai nesukelia greito ir stipraus imuninio atsako, todėl "EpiVacCorona" skiriamas du kartus lygiomis dozėmis po 21 dienos pertrauką.
Koks šalutinis poveikis?
I-II fazės tyrimų savanoriai pranešė apie lengvą skausmą injekcijos vietoje, kuris greitai išnyko. Kitų nemalonumų nepastebėta.
Neoficialiame "Telegram" kanale #EpiVacCorona, kurį sukūrė dalyviai po registracijos (III fazė), jie praneša apie minimalų šalutinį poveikį: diskomfortą, paraudimą injekcijos vietoje dienos metu, stiprų peties skausmą. Niekas neturėjo didelio karščiavimo, raumenų skausmų, arba nebuvo įmanoma patvirtinti ryšio su vakcina.
Kiek efektyvi yra "EpiVacCorona"?
"Yra imunologinis ir profilaktinis veiksmingumas. Pirmasis yra specifinių antikūnų gamyba. Remiantis klinikinių tyrimų I-II fazių rezultatais, visiems savanoriams susidarė specifiniai antikūnai. Prevencinis veiksmingumas yra paskiepytų asmenų apsauga nuo ligos. Tyrimai tęsiami atliekant klinikinius tyrimus po registracijos, duomenys bus vasario mėnesį", — komentavo "Rospotrebnadzor" spaudos tarnyba.
I-II fazės klinikiniai tyrimai dar nebaigti, patikslino Valstybinis tyrimų centras "Vektor". Yra tik tarpiniai rezultatai.
Šiuo metu atliekamas dvigubai aklas, atsitiktinių imčių tyrimas su placebo grupe. Žmonės yra atsitiktinai suskirstyti į grupes. Nei savanoriai, nei gydytojai nežino, kas gauna vakciną, o kas — fiziologinį tirpalą. Iš 3 000 dalyvių 2 897 buvo paskiepyti, o ketvirtadalis gavo placebą. Tyrimai bus baigti praėjus 180 dienų nuo paskutinio savanorio vakcinacijos.
Tuo pačiu metu atliekami 150 savanorių, vyresnių nei 60 metų, bandymai. Preliminarūs šios grupės duomenys taip pat bus paskelbti vasario mėnesį.
Kaip savarankiškai išbandyti vakcinos poveikį?
Atliekant kraujo tyrimą dėl koronaviruso S-baltymo IgG antikūnų ne anksčiau kaip praėjus 35–42 dienoms po pirmosios vakcinacijos. Tačiau ne visos testų sistemos gali pamatyti "EpiVacCorona" gaminamus antikūnus.
Anot "Rospotrebnadzor", tam tinka tik "SARS-CoV-2-IgG-Vektor" testų sistema, kurią sukūrė Valstybinis tyrimų centras "Vektor". "Jis turi didelį jautrumą ir specifiškumą nustatant antikūnus tam tikroms koronaviruso sritims, kurie naudojami vakcinoje "EpiVacCorona", sakoma agentūros svetainėje.
"Remiantis ribotos grupės stebėjimo duomenimis, buvo nustatyta, kad bandymų sistema "SARS-CoV-2-RBD-ELISA-Gamalėja" duoda daugumos imunizuotų peptidinės "EpiVacCorona" vakcinos teigiamą rezultatą. Remiantis gamintojo informacija, testų sistema yra reagentų rinkinys imuninei fermentų analizei", — patikslina "Vektor".
Be to, pasak kūrėjo, rekombinantinis S1 baltymas, kurį gamina "Sanyou Biopharmaceuticals", "mato" antikūnus prieš "EpiVacCorona" vakciną.
Remiantis III fazės savanorių bandytojų pastebėjimais, nepriklausomai išlaikius testus, IgG antikūnai buvo aptikti trims žmonėms, kurie pirmą kartą skiepyti praėjusių metų gruodį.
Kas dar kuria peptidines vakcinas nuo koronaviruso?
Peptidinės vakcinos visame pasaulyje yra eksperimentinėje stadijoje. Jų kūrimas ir patvirtinimas yra labai daug darbo reikalaujantys procesai, todėl jie atsilieka nuo iRNR, vektorinių ir inaktyvuotų/nužudytų vakcinų. Rusija turi pakankamai išteklių ir kvalifikuoto personalo, kad pati galėtų išspręsti šią problemą.
PSO sausio 19 dienos sąraše, be "EpiVacCorona", yra dar dvi peptidinės vakcinos-kandidatės. Jos išbandomos su žmonėmis.
Tiubingeno universitete (Vokietija) sukurtą multipeptidinį "kokteilį" P-pVAC-SARS-CoV-2 sudaro šeši skirtingų koronaviruso baltymų peptidai ir patentuotas lipopeptidas XS15 kaip adjuvantas. Vykdomas I etapo testavimas.
Taivano bendrovės "United Biomedical Inc. Asia" ir Amerikos COVAXX preparatas UB-612 apima dviejų S-baltymų subvienetų (nukreiptų į B ląstelių atsaką) ir T-epitopų fragmentus iš membraninių ir nukleokapsidinių baltymų, kad susidarytų T-ląstelių atsakas. Vyksta II-III fazės bandymai.
